Liên hệ tư vấn: 

0865 056 086

 sales@lifesciences.vn

Tăng tốc độ phân tích ELISA với SimpleStep ELISA® 384 giếng và PHERAstar® FSX

Tăng tốc độ phân tích ELISA với SimpleStep ELISA® 384 giếng và PHERAstar® FSX

Jamie Campbell (Giám đốc Customer Solution EMEA – Abcam, Cambridge Vương quốc Anh) Oliver Carney (BMG LABTECH, Aylesbury, Vương quốc Anh)

ELISA truyền thống dù là tiêu chuẩn vàng trong phát hiện và định lượng protein vẫn tồn tại những hạn chế như thời gian thực hiện lâu, nhiều bước rửa và yêu cầu thể tích mẫu lớn, gây khó khăn cho việc ứng dụng trong quy trình thông lượng cao. Công nghệ SimpleStep ELISA® của Abcam đã khắc phục những hạn chế này bằng cách đơn giản hóa quy trình, rút ngắn thời gian xuống chỉ còn 90 phút với một lần rửa duy nhất. Sự đơn giản hóa này không chỉ giúp tiết kiệm thời gian mà còn giảm thiểu nguy cơ sai sót trong quá trình thực hiện, đồng thời giảm lượng mẫu cần thiết, mở rộng khả năng ứng dụng cho các mẫu có thể tích hạn chế.

Đặc biệt, SimpleStep ELISA® có thể được thu nhỏ thành định dạng 384 giếng, cho phép xử lý lượng mẫu gấp 4 lần. Điều này đặc biệt hữu ích trong các nghiên cứu sàng lọc hoặc phân tích số lượng lớn mẫu, giúp tăng năng suất và hiệu quả công việc. Khi kết hợp với máy đọc đĩa PHERAstar® FSX của BMG LABTECH, thời gian đọc kết quả ELISA 384 giếng được rút ngắn đáng kể (dưới 1 giây mỗi giếng). Ngoài ra, phần mềm MARS của BMG LABTECH còn hỗ trợ tự động tạo đường cong chuẩn và định lượng mẫu, giúp tiết kiệm thời gian và công sức.

Ứng dụng của SimpleStep ELISA® 384 giếng kết hợp với PHERAstar® FSX đã được chứng minh trong việc định lượng IgG và IFN gamma ở người, hai mục tiêu quan trọng trong nghiên cứu dược động học và thử nghiệm an toàn thuốc miễn dịch trị liệu.

Định lượng IgG người là một chỉ số quan trọng cung cấp thông tin cho các nghiên cứu biểu hiện kháng thể. Bộ kit Human IgG SimpleStep ELISA® đã được thẩm định trong huyết thanh, huyết tương, dịch nuôi cấy tế bào và dịch ly giải mô. Dưới đây là một số kết quả của thử nghiệm với SimpleStep ELISA® 384 giếng.

Hình 1. Đường cong chuẩn khớp 4 tham số cho bộ kit Human IgG SimpleStep ELISA® (ab195215) ở định dạng 384 giếng được đọc trên PHERAstar® FSX với quy trình có độ chính xác cao (r2 0.9999).
 
Hình 2. Đường cong chuẩn điển hình cho bộ kit Human IgG SimpleStep ELISA® (ab195215) ở định dạng 96 giếng. IFN gamma người là một yếu tố then chốt để đánh giá các đáp ứng tế bào T, nhiều trong số đó liên quan đến synap miễn dịch, vốn rất quan trọng trong ung thư và miễn dịch ung thư. Ví dụ về các xét nghiệm như vậy bao gồm xét nghiệm hỗn hợp tế bào lympho (MLR), xét nghiệm đồng kích thích hoặc tái hoạt hóa tế bào T. Bộ kit Human IFN Gamma SimpleStep ELISA® đã được thẩm định trong huyết thanh, huyết tương và dịch nuôi cấy tế bào.
Hình 3. Đường cong chuẩn khớp 4 tham số cho bộ kit Human IFN gamma SimpleStep ELISA® (ab174443) ở định dạng 384 giếng, được đọc trên PHERAstar® FSX với quy trình có độ chính xác cao (r2 0.9993).

 

Hình 4. Đường cong chuẩn điển hình cho bộ kit Human IFN gamma SimpleStep ELISA® (ab174443) ở định dạng 96 giếng. Hình 1 và 3 chứng minh rằng đường cong chuẩn tốt thu được ở định dạng đĩa vi mô 384 giếng cho cả hai bộ kit SimpleStep ELISA® được thử nghiệm. Các đường cong này có thể so sánh với các đường cong chuẩn thu được với cùng bộ kit ở định dạng 96 giếng (Hình 2 và 4).

 

Bộ kit SimpleStep ELISA® định dạng 384 giếng giúp tăng hiệu suất xét nghiệm ELISA lên 4 lần, rút ngắn thời gian xuống 90 phút và giảm thể tích mẫu xuống 50µL, đồng thời vẫn đảm bảo độ nhạy, độ đặc hiệu và độ tái lặp. Việc kết hợp với máy đọc PHERAstar® FSX giúp đo độ hấp thụ cực nhanh (dưới 1 giây/giếng) và tự động phân tích dữ liệu với phần mềm MARS, tối ưu hóa quy trình và tiết kiệm thời gian, phù hợp cho các ứng dụng thông lượng cao.

 

Tài liệu tham khảo:

  1. Highly sensitive ELISAs in 90-minutes: SimpleStep ELISA® kits and the SPECTROstar® Nano – Application note.
  2. 384-Well SimpleStep ELISA® Microplate protocol.
  3. Huse M, et al. T cells use two directionally distinct pathways for cytokine secretion. Nat Immunol. 2006 Mar;7(3):247-55.

Chia Sẻ Bài Viết:

Facebook
Twitter
LinkedIn

Bài Viết Liên Quan

Contact Me on Zalo